Для получения имеющих практическое значение антителосекретирующих гибридом используются лимфоидные клетки, выделенные из различных источ-ников, например, из селезенки или лимфатических узлов. При использовании для первичной иммунизации большинства чужеродных белков, полисахаридов и т. д. применяют следующую схему иммунизации: обычно вводят внутрибрю-шинно 1—100 мкг антигена, смешанного с равным объемом полного адъюванта Фрейнда (ПАФ). Затем с интервалом 2—3 недели проводят одну или более внутривенных инъекций данного антигена в физиологическом растворе. Через 1—2 дня после последней инъекции клетки селезенки выделяют и сливают с клетками выбранной миеломной линии. Более интенсивная и короткая схема иммунизации используется для получения гибридом из клеток лимфатических узлов. В этом случае мыши вводят подкожно в подушечки задних лап, паховые районы и в несколько точек вдоль позвоночника 10—300 мкг антигена в ПАФ. Через три дня процедуру повторяют, используя вместо ПАФ неполый адъювант Фрейнда, а затем с интервалом в 3—4 дня делают еще четыре инъекции антигена в физиологическом растворе. Через день после последней инъекции регионарные лимфоузлы, дренирующие область подкожных инъекций, удаляют, суспендируют и далее проводят слияние как обычно. Данная схема иммунизации является модификацией процедуры получения обычных гетерогенных анти-идиотипических сывороток, описанной в работе Либермана и др. [36].

Иммунизация корпускулярными антигенами, например чужеродными клетками крови, бактериями, различными паразитами, опухолевыми клетками или клетками, инфицированными вирусами, может проводиться без ПАФ путем 3—4 внутрибрюшинных инъекций с интервалами в 2—3 недели. При последней инъекции 5-Ю7 клеток вводят внутривенно, а спустя 1—2 дня получают клетки селезенки и проводят слияние.

Данные примеры приведены лишь в иллюстративных целях. В действи-тельности же схемы иммунизации, применяемые разными исследователями, значительно варьируют и определяются в большой степени имеющимся количе-ством и типом антигена. Использование клеток лимфатических узлов обладает тем преимуществом, что образуется больше гибридов, продуцирующих IgG. Эти антитела имеют преимущества перед моноклональными IgM-антителами ввиду большей легкости их выделения и очистки.

Помимо приведенных схем иммунизации описаны методы иммунизации клеток грызунов in vitro [37]. При получении гибридом грызунов такая иммуни-зация может и не иметь преимуществ перед иммунизацией in vivo, так как пред-варяющая слияние антигенная стимуляция В-клеток в данном случае оказывается лишь дополнительным этапом. В то же время, поскольку при создании человеческих гибридом часто невозможно получить клетки от иммунизирован-ных больных, можно надеяться, что проведение в этих случаях антигенной стимуляции in vitro повысит частоту слияния опухолевых клеток с В-клетками соответствующей специфичности [38, 39].