Создание В-клеточных гибридом не только позволило производить специ-фические моноклональные антитела, но и помогло глубже понять генетические механизмы, обусловливающие разнообразие антител. Как говорилось в гл. 3, пре-В-клетки — первые идентифицируемые элементы В-клеточного ряда — обнаруживаются в эмбриональной печени млекопитающих. Поскольку популяция пре-В-клеток гетерогенна и немногочисленна, анализирвать иммуноглобу-линовый фенотип пре-В-клеток в том случае, когда они берутся из свежевы-деленной печени, довольно трудно [66]. В то же время, получив из пре-В-клеток гибридомы, можно вырастить клоны сравнительно редких клеток [66], что позволяет анализировать экспрессию иммуноглобулиновых генов и синтез иммуноглобулинов. Было показано, что в таких гибридомах гены FH перестроены, а гены FL — нет 167, 68J. Это наблюдение подтвердилось в опытах по изучению линий В-клеток, трансформированных вирусом Абельсона, откуда был сделан вывод, что при созревании В-клеток определенный ген Ун может, по-видимому, свободно комбинироваться с различными генами FL [69]. Аналогичный подход использовали для изучения механизма переключения генов Ig в В-клетках, трансформированных вирусом Абельсона, где, по-видимому, происходит спонтанное переключение с синтеза и.-цепей на синтез 72Ь-цепей [34]. Для этого получали независимые гибридомы из IgM- и из ^02ь-секретирующих клеток. Таким образом оказалось возможным стабилизировать геном в обеих произошедших от общего предка клеточных линиях в виде клонов и, сравнивая секретирующие гибридомы, получить информацию о генных перестройках при переключении изотипа в пределах одной клонированной линии.

Крайне информативным оказалось использование гибридом для анализа разнообразия антител, образующихся в ходе иммунного ответа. От мышей, имму-низированных а 1-3-декстраном или фосфорилхолином, стандартными методами было получено большое количество гибридом со специфичностью именно к этим антигенам. Несмотря на то что ответ на эти антигены считался высоко гомогенным, анализ аминокислотной последовательности секретируемых гиб-ридомами антител показал, что они представляют собой семейство довольно близких друг к другу, но в то же время достаточно гетерогенных антител [70, 71]. Аналогично для получения информации об иммуноглобулиновых генах и меха-низмах, обусловливающих разнообразие антител, была успешно использована панель гибридом, специфичных к гаптенам арсонату и нитрофенилу [72, 73]. Итак, благодаря возможности клонировать клетки иммунной системы было получено большое количество новых данных о механизмах рекомбинации, обусловливающих разнообразие V-районов иммуноглобулинов, и особенно о роли соматических мутаций в возникновении разнообразия антител [74].

К использованию гибридом для изучения генетических механизмов, лежа-щих в основе разнообразия антител, имеют отношение и попытки создания антиген-специфических гибридом с фенотипами, соответствующими различным стадиям дифференцировки В-клеток. Подобные попытки, однако, не всегда были успешными. Частично это может быть связано с несоответствием фенотипов сливающихся клеток. Некоторые данные по этому вопросу получены в опытах по слиянию пре-В-клеток с клетками миеломы, в которых полученные гибридомы синтезировали главным образом секреторные р.-цепи [75]. Усилия по созданию гибридом, обладающих фенотипом В-клеток, т. е. экспрессирующих специфичные по отношению к антигену поверхностные иммуноглобулины, и остающихся чувствительными к факторам регуляции роста, оказались безуспешными, что объясняется, возможно, доминированием фенотипов окончательно дифферен-цированных клеток миеломных линий, использованных для слияния.