
В зависимости от того, каким образом планируется использовать монокли-нальные антитела, их можно выделять множеством различных способов.
При росте гибридом в культуре в супернатантах обычно содержится 10— 100 мкг/мл чистых моноклональных антител. Их можно использовать без допол-нительной очистки (возможно, после некоторого концентрирования) в качестве первых антител для непрямой флуоресценции или при иммунопреципитации. Если необходима дальнейшая очистка антител от присутствующих в культу-ральной среде сывороточных белков, то можно использовать аффинную хроматографию на сефарозе, конъюгированной с козьими или кроличьими антимышиными Ig или белком А. Если требуются большие количества антител, тогибридому можно выращивать в виде трансплантируемой опухоли у мышей гистосов-местимой линии. При этом необходимо предварительно (в период от трех дней до одного месяца до инъецирования) ввести мыши внутрибрюшинно 0,5 мл минерального масла, например пристана (Pristane — Aldrich Chemical, Co., Milwaukee).
В асцитах накапливается большое количество антител (1—25 мг/мл), которые затем можно очистить с помощью аффинной хроматографии на сефарозе-4В, конъюгированной с соответствующим антигеном или путем обычной ионообменной хроматографии с последующей гель-фильтрацией. Очищенные антитела следует хранить в забуференном боратом физиологическом растворе, содержащем какой-либо консервант, например 0,1 % азида натрия, при 4°С, так как повторяющиеся циклы замораживания — оттаивания, судя по всему, пагубно влияют на стабильность мышиных моноклональных антител.