Какой бы параметр мы не использовали для количественного описания конкуренции немеченого антигена с меченым, он всегда будет функцией кон-центрации связанного, или концентраций связанного и свободного радиоак-тивномеченного антигена. Поэтому одно из наиболее жестких методических требований заключается в том, чтобы уметь отличать связанную с антителом радиоактивномеченную молекулу антигена от свободной. Это обычно предполагает физическое разделение связанной и свободной метки и независимое измерение радиоактивности в обеих фракциях. Если фракция связанного ли-ганда загрязнена свободным лигандом, или наоборот, то в результате может получиться очень большая ошибка, величина которой будет зависеть от того, какой части стандартной кривой соответствуют условия эксперимента.