
До сих пор мы предполагали, что меченый и немеченый антигены добав-ляются одновременно, и при этом время инкубации достаточно велико для того, чтобы система смогла перейти в состояние равновесия. Конечно же, при определении аффинности должно быть достигнуто равновесие. Однако пред-положим, что единственная цель нашего эксперимента заключается в измерении с помощью РИА концентрации конкурента. В этом случае оказывается возможным существенно повысить чувствительность метода, если сначала нанести немеченый конкурент, позволяя ему свободно взаимодействовать с антителами, а затем — добавить меченый антиген и через небольшой промежуток времени провести измерения. Интервал времени должен быть достаточно малым, чтобы равновесие не успело установиться. В такой постановке эксперимента дается существенное преимущество конкурирующему антигену. Можно показать, что в данном случае наклон кривой графика «доза — эффект» (зависимости B/F от общей концентрации добавленного антигена), численно характеризующий чувствительность эксперимента, в области низких доз будет увеличиваться. Подробный математический анализ этой процедуры можно найти в работе Родбардаидр. [49]. Отметим, однако, что использование подобных нерав-новесных условий требует очень тщательного контроля за временем и темпе-ратурой.