При проведении РИА метод разделения на твердой фазе особенно удобен тогда, когда необходимо обработать большое количество образцов. Преимущест-вом его является потенциальное увеличение аффинности антитела к лиганду по сравнению с собственной (intrinsic) аффинностью (что обусловлено обсужденными выше эффектами на границе твердой и жидкой фаз). Однако данный метод имеет и недостатки, связанные с тем, что в нем вследствие этих же самых эффектов измеряется не истинная собственная (true intrinsic) аффинность. Сам по себе метод достаточно прост. Сначала необходимо пришить антитела к твердой поверхности, например к гранулам сефарозы, на стенку пробирки или пластиковой лунки. В последнем случае, поскольку большинство белков неспецифически сорбируется на пластике (на поливинилхлориде легче, чем на полистироле), то обычно просто инкубируют антитела в пластиковой лунке, а затем таким же образом другим белком (например, бычьим сывороточным альбумином) заполняют незанятые места. Чтобы избежать при этом конкуренции со стороны других сывороточных белков, на данной стадии необходимо использовать только очищенные антитела. Концентрацию сорбирующихся антител можно менять, варьируя тип пластика или концентрацию антител в среде. После того как стенки лунок (или гранулы сефарозы) покроются слоем антител, в этих лунках инкубируют меченый антиген в присутствии или в отсутствие немеченого конкурирующего антигена, и после отмывки прямо измеряют количество радиоактивной метки, адсорбировавшейся на стенках (для этого предварительно вырезают данную ячейку из пластикового планшета) или на гранулах сефарозы. Метод связывания со стенками лунок пластикового планшета особенно полезен для обработки большого количества образцов. Однако, поскольку концентрация или даже количество адсорбировавшихся на стенках антител неизвестны и поскольку определяемая таким образом аффинность не является собственной аффинностью, этот метод нельзя использовать для получения химических характеристик реакции антиген—антитело. К тому же с помощью данного метода обычно определяют лишь концентрацию связанного антигенаи очень редко при этом измеряют независимо концентрацию свободного антигена. Тем не менее если требуется узнать концентрацию неизвестного конкурентного антигена путем сравнения результатов эксперимента со стандартной кривой, то для данной задачи метод связывания на стенках пластиковых лунок, по-видимому, является идеальным. Детальный анализ того, при каких значениях параметров этот метод дает наилучшие результаты, осуществили Цоллин-гер и др. [43].