Некоторые системы антиген—антитело слишком сложны для того, чтобы их можно было изучать с помощью иммунодиффузии. Чаще всего сложность заключается либо в слишком большом количестве полос преципитации, либо в слишком близком расположении полос друг к другу. Метод иммуноэдект-рофореза сочетает в себе электрофорез и иммунодиффузию, идущую в направлении, перпендикулярном направлению электрофореза (рис. 23.22). На первом этапе тестируемые антигены разделяют с помощью электрофореза по заряду, а на втором происходит их диффузия, которая для каждого антигена начинается из той точки, до которой он дошел в ходе первого этапа. Это эквивалентно тому, что каждый антиген как бы начинает диффузию из своей лунки (см. рис. 23.22, А, справа). Затем в агаре вырезают горизонтальный желобок, который заполняют антисывороткой, содержащей антитела ко всем компонентам. После этого начинается иммунодиффузия между отделенными друг от друга антигенами и линейным источником антител. Результаты, полученные для смеси трех антигенов, оказываются близкими к результатам, полученным для трех антигенов, находящихся в отдельных лунках [119]. Иск-ривление, слияние и укорочение линий преципитации можно анализировать точно так же, как было описано выше. Разрешение каждой полосы несколько ухудшается вследствие размытости источника диффузии во время электрофореза. Тем не менее, например, иммунодиффузия белков нефракционированной человеческой сыворотки, значительно облегчается, если сыворотку предварительно Подвергнуть электрофорезу. Если же диффузию начинать из одной общей лунки, то видимыми окажутся лишь наиболее широкие полосы, тогда как предварительное проведение электрофореза позволяет наблюдать отдельные линии преципитации, соответствующие каждому из разделенных компонентов. Если после этого в геле вырезать параллельно направлению электрофореза желобок и заполнить его моноспецифической антисывороткой, то в результате можно будет идентифицировать все полосы преципитации.

Иммуноэлектрофорез широко используется для обнаружения мие-ломных белков в человеческой сыворотке. Тестируемую сыворотку вносят в лунку и подвергают электрофорезу, после чего проводят иммунодиффузию про-тив внтисыворотки к белкам человеческой сыворотки, к х- или Я-цепям им-муноглобулинов человека. Наблюдаемое на рисунке 23,22, Н уширение дуги преципитапии IgG у больных 1 и 2, судя по всему, обусловлено присутствием аномальных молекул IgG. Точно такой же электрофоретической подвижности соответствует у больного 1 линия преципитации с антителами к х~цепям, но не к Я-цепям (у больного 2 — наоборот), что служит серьезным основанием для постановки диагноза миеломной или моноклональной гаммапатии, поскольку эти белки, как известно, являются продуктом единственного клона, синтезирующего легкие цепи только одного из двух типов. У человека в нормальных иммуноглобулинах имеются оба изотипа легких цепей, хотя содержание х цепи превышает содержание Я-цепи примерно в два раза. Как можно видеть на рис. 23.22,В (больной 2), аномальная дуга с -у-подвижностью реагирует с анти-IgG- и анти-Я, но не с анти- х. Следовательно, она соответствует моноклональному белку IgG-Я. У больного 1, наоборот, ненормальный сывороточный компонент реагирует с анти-IgG и анти-х, но не с анти- к, что говорит о присутствии миеломного белка IgG-x.