Поскольку антигены полисахаридной природы распространены повсеместно, неудивительно, что среди случайно индуцированных миеломных имму-ноглобулинов часто обнаруживаются белки, специфичные по отношению к углеводам. Тщательное изучение этих моноклональных антител послужило доводом в пользу клональной модели разнообразия антител: в отношении аффинности и специфичности гетерогенные антисыворотки ведут себя как сумма многих индивидуальных клонов антител. Было показано, что два миеломных белка W3129 и W3434, принадлежащих классу IgAx, оказались специфичными к декстранам, имеющим в своем составе связи cc-Glu (1 -»-6) [60]. Эксперименты ^о торможению преципитации с помощью различных моно-, ди-и олигосахаридов возрастающей длины показали, что энергия связывания белка с одной молекулой глюкозы составляет 75%, с двумя — 95%, с тремя — 95—98%, а с четырьмя — 100% максимальной энергии взаимодействия белка с олигосахаридом. Эти результаты показывают, что наибольший вклад в энергию взаимодействия декстрана со специфичным к нему антителом вносит концевой сахар декстрана и что олигосахариды с длиной цепи 4—6 остатков обычно заполняют весь антигенсвязывающий центр антитела. Человеческие антидекстрановые антитела ведут себя аналогичным образом. Энергия их связывания с тетрасахаридами составляет 95% максимальной энергии связывания. На основе этих экспериментов впервые было получено приближенное значение размера антигенной детерминанты, равное 4—6 остаткам [79, 80].И миеломные белки, и антисыворотки обладают высокой специфичностью по отношению к гликозидной а (1 —> 6)-связи концевого сахара в сравнении с а (1 -»-3)-связыо, а их аффинность к декстрану оказывается весьма чувствительной к модификациям концевого сахара. В то же время модификации третьего или четвертого сахара олигосахарида сравнительно мало влияют на способность гаптена тормозить преципитацию декстрана реагирующими с ним миеломными белками и сывороточными антителами.

В исследованиях, выполненных на других декстрансвязывающих миелом-ных белках [81], было обнаружено, что не все антиполисахаридные моно-клональные антитела специфичны именно к невосстанавливающему концу олигосахарида. Таким свойством не обладают, например, антитела QUPC52. Эксперименты по конкурентному торможению моно- и олигосахаридами связывания этих антител с декстранами показали, что энергия взаимодействия моно- и дисахарида с антителом составляет менее 5%, энергия связывания трисахарида — 72%, тетрасахарида — 88%, гексасахарида — 100%. Эти результаты отличны от данных, полученных с другими миеломными белками. Второе отличительное свойство миеломного белка QUPC52 заключается в его способности осаждать неразветвленный декстран длиной в 200 остатков. Поскольку у неразветвленного декстрана имеется лишь один невосстанавливаю-щий конец цепи и поскольку белок QUPC52 является моноспецифичным, то связывание данного белка с невосстанавливающими концами молекул такого декстрана не должно приводить к образованию преципитационной решетки. Поэтому наблюдаемую в этом случае преципитацию можно объяснить лишь тем, что белок QUPC52 связывается с какой-либо другой детерминантой, представляющей собой, по-видимому, неконцевой олигосахаридный фрагмент длиной 3—7 остатков. В отличие от QUPC52 белок W3129 специфичен именно к концевой детерминанте и, естественно, не способен осаждать неразветвлен-ные декстрановые цепи. Антитела, осаждающие линейные цепи декстрана, обнаружены также в шести человеческих антидекстрановых сыворотках, составляя в них от 48 до 90% всех антител, специфичных к разветвленным декстра-новым цепям. Таким образом, антидекстрановые антитела можно разделить на специфичные к концевым и к внутрицепочечным олигосахаридам. В настоящее время получены моноклональные антитела как одного, так и другого типа, в человеческой же иммунной сыворотке присутствуют оба типа антител. Цизар и др. [81] предположили, что различие в специфичности белков W3129 и QUPC52 по отношению к концевым и внутренним олигосахаридным участкам связано с разной топологией их антигенсвязывающих центров. Концевые и внутренние олигосахаридные участки имеют почти идентичную структуру, различаясь лишь наличием у внутренних участков гликозидной связи в том месте, где у концевых участков находится связь С—ОН. Возможно, что специфичность белков W3129 и QUPC52 обусловлена пространственной структурой их антигенсвязывающих центров, например существованием у W3129 полости, в которую может поместиться лишь конец цепи, и наличием на поверхности QUPC52 желобка, позволяющего остальным частям полимера выходить наружу с обеих сторон. Более точный ответ на этот вопрос можно получить лишь на основе рентгеноструктурного анализа комплексов молекул антигена с антигенсвязывающими центрами моноклональных антител известной специфичности.

Развитие гибридомной техники дало возможность получать моноклональные антитела любой заданной специфичности. С помощью иммунизации мышей слаборазветвленным декстраном (предпочтительным антигеном для QUPC52) и последующих слияния (гибридизации) и отбора антител, связывающих линейный декстран, было получено 12 гибридом [82] со специфич-ностью, аналогичной специфичности QUPG52. В исследованиях по торможению олигосахаридами связывания каждого из 12 типов моноклональных антител с декстранами увеличение количества мономеров в олигосахариде с 2 до 6 приводило, во-первых, к значительному возрастанию аффинности олиго-сахарида к антителам; при этом энергия взаимодействия антитела с триса-харидом составляла 49—77% от ее максимального значения [59]. Во-вторых, антитела всех 12 типов обладали специфичностью по отношению к связи а (1 —*-6), так как все они были способны осаждать линейный декстран. В-третьих, 9 из 11 типов моноклональных антител BALB/c давали иммуно-логический перекрест с QUPG52 и ни один — с W3129 [83]. Эти данные под-тверждают гипотезу, согласно которой различные антитела с одинаковой специфичностью и сходной желобоподобной структурой антигенсвязывающего центра могут происходить из одного и того же семейства гаметных Ун-генов [831. Большое количество антигенов углеводной природы в окружающей среде и высокая степень специфичности антител, появляющихся в ответ на каждый такой антиген, дают основание предположить, что существует колоссальное разнообразие молекул антител, из числа которых могут быть отобраны антитела на все возможные антигены. Для объяснения механизма регуляции работы такой системы была выдвинута теория «сети», согласно которой антитела сами по себе узнаются другими антителами в качестве антигенов (см. гл. 22 и работу [84]). Иммунный ответ на стрептококковый полисахарид представляет собой яркий пример того, как антиидиотипические антитела могут регулировать ответ на антиген [85].