
Наиболее простой случай — это взаимодействие антител с моновалентным лигандом. Сюда мы можем отнести реакцию антигаптеновых антител с истинно моновалентными гаптенами, а также реакцию с макромолекулами специфических антител, фракционированных для получения популяции, взаимодействующей только с одним неповторяющимся участком на антигене2. В последнем случае антиген ведет себя как моновалентный лишь при взаимодействии со строго определенной популяцией антител. Замечание о том, что участок узнавания (антигенная детерминанта) не должен быть повторяющимся, т.е. может встречаться в каждой молекуле антигена лишь однажды, конечно же является принципиальным.
Если антигенсвязывающие центры, находящиеся на одной молекуле ан-титела, независимы (т.е. не обнаруживают при связывании антигена ни поло-жительной, ни отрицательной кооперативности), то во многих случаях такие участки, реагирующие с моновалентными лигандами, ведут себя так, как если бы они представляли собой отдельные молекулы. Поэтому многие (но не все) свойства, которые мы будем обсуждать, можно анализировать на уровне кон-центрации связывающих участков антител независимо от количества таких участков, приходящихся на одну молекулу антитела (2 для IgG и IgA, 10 для IgM).
При определении аффинности какого-либо антитела обычно измеряют рав-новесные концентрации связанного и свободного лиганда при увеличивающей-что он применим лишь для достаточно небольших по размеру антигенов, спо-собных свободно проходить через непроницаемую для антител мембрану. Еще один технический недостаток метода заключается в том, что концентрация связанного антигена определяется как разность суммы концентраций связанного и свободного антигена в другом отсеке, а не измеряется независимо от свободного антигена.
В методах, относящихся к другой группе, используются радиоактивно-меченные лиганды, находящиеся в равновесии с антителами. В этих методах предусматривается физическое разделение свободного и связанного с антителами лиганда и независимый подсчет количества того и другого. Ряд методов, используемых для разделения свободного и связанного антигена, будет обсуждаться ниже в разделе, посвященном радиоиммунологическому анализу. Их применение обычно позволяет провести независимое измерение концентраций связанного и свободного антигена, но при этом может нарушаться равновесие.