
Антигенные детерминанты некоторых биологически важных соединений построены из углеводов. Такие детерминанты часто входят в состав гликоли-пидов (например, антигены клеточных стенок бактерий и главные антигены групп крови) и гликопротеинов («минорные» групповые антигены крови, такие, как резус-фактор Rh). Кроме того, некоторые спонтанно появляющиеся мие-ломные белки, как было показано, обладают специфичностью по отношению к углеводам, что, возможно, отражает широкую распространенность углеводных антигенов в окружающей среде. До появления гибридом такие миелом-ные белки широко использовались для изучения реакции антигена с моно-клональными антителами.
Из экспериментов следует, что основные антигенные детерминанты поли-сахаридов часто представляют собой короткие олигосахариды (длиной 1—5 остатков сахара), находящиеся на невосстановленных концах полимерных цепей [73J. Каждая детерминанта аналогична гаптену, состоящему из нескольких остатков сахара и пришитому к большому полисах аридному остову, не обладающему антигенными свойствами. Полимерная цепь в данном случае служит для усиления иммуногенности антигенной детерминанты, т. е. играет ту же роль, что и носитель для гаптена. Кроме того, наличие в полисахариде точек ветвления дает возможность одной макромолекуле иметь много антигенных детерминант. Это оказывается важным для иммунопреципитации, поскольку позволяет сформировать преципитационную решетку (см. ниже).
Для определения антигенных детерминант полисахаридов наиболее широко используется так называемый метод торможения гаптеном [73], заключающийся в том, что при добавлении коротких олигосахаридов реакция преципитации антигена с помощью антител может тормозиться. Такие олигосахариды обладают достаточно большим размером, чтобы связываться с антителами с той же аффинностью и с той же специфичностью, что и полисахариды, однако, являясь мономерами, они оказываются неспособными вызывать преци-питацию. По мере увеличения количества добавленного ингибитора в молекулах антител остается все меньше антигенсвязывающих центров, которые могут принимать участие в реакции преципитации. Используя в качестве препарата антител антисыворотку, специфичную к какой-либо одной антигенной детерминанте, часто путем добавления коротких олигосахаридов, соот-ветствующих невосстанавливающему концу полисахаридной цепи, можно полностью блокировать преципитацию. Эти данные свидетельствуют не только об «иммунодоминантности» невосстанавливающего конца цепи, но также и о том, что специфические свойства антигенной детерминанты полисахарида определяются последовательностью входящих в ее состав Сахаров и способом их соединения друг с другом, а не конформацией. Полное ингибирование можно получить лишь в том случае, когда все антитела в изучаемой системе специфичны к одной и той же антигенной детерминанте. Для достижения максимальной чувствительности концентрации антигена и антител должны соответствовать точке эквивалентности.
Теперь на трех классических примерах О-антигенов бактерий рода сальмо-нелл, групповых антигенов крови и декстранов, связывающихся с миелом-ными белками, мы рассмотрим более подробно типы встречающихся антигенов углеводной природы.